AEC底物顯色試劑盒的操作步驟及注意事項


AEC底物顯色試劑盒使用方法:(僅供參考)
1.工作液配制:
取850ul無菌雙蒸水,依次加入50ul溶液A、50 ul溶液B、50ul溶液C、混合均勻,即配成AEC工作液。如需要更大體積工作液,可按相應比例放大。此溶液必須現用現配,配好后避光保存,半小時內使用,過期后請將剩余的液體廢棄。
2.顯色:
1)蛋白質印跡膜顯色:將配制好的工作液滴加在印跡膜上(或將印跡膜浸入AEC工作液中),顯色時間一般為10-30min。顯色完畢后,將膜浸入蒸餾水中,終止反應。
2)組織切片染色:向組織切片上加入適量AEC工作液,確保能充分覆蓋樣品。室溫孵育10-30 min,避免光照,直至顯色至預期深淺。可在顯微鏡下觀察控制顯色時間。顯色后用蒸餾水洗滌即可終止顯色反應。
3)對于組織切片或細胞樣品,顯色反應終止后,可對其進行其他染料復染。對于膜,顯色反應終止后,可以室溫晾干避光保存。
AEC底物顯色試劑盒注意事項:
由于AEC生成的顏色產物為脂溶性,因此用于IHC顯色后不適合梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片,須用水性封片劑封片。
根據情況自行優化實驗條件,調整顯色時間,獲得最佳顯色效果。
AEC有一定毒性,操作時請采取必要的防護措施。
 
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